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Décision n° 080004DR13 du 16 juillet 2008 fixant les tarifs des prestations de service effectuées par la plate-forme production de protéines CRBM

DR13 – Délégation Languedoc-Roussillon

Vu délib. CA CNRS du 29-03-2001 ; DEC. n° 030130DAJ du 19-12-2003 ; DEC. n° 030129DAJ du 19-12-2003.

Art. 1er. - Les tarifs des prestations de service effectuées par la plate-forme production de protéines CRBM sont fixés selon les barèmes joints en annexe.

Le taux de TVA applicable à ces prestations est de 19,6 %.

Art. 2. - Ces tarifs prennent effet à compter du 1er janvier 2008.

Fait à Montpellier, le 16 juillet 2008.

Pour le directeur général et par délégation :
Le délégué régional Languedoc-Roussillon,
Bernard JOLLANS

Annexe :
Plateforme de production de protéines CRBM
Tarification 2008

 

HT

Clonage dans un vecteur d’expression :

100 €

- PCR ou extraction du fragment d’un autre vecteur

- Ligature dans un vecteur d’expression

- Vérification par séquençage des inserts clonés (PCR)

- Maxiprep du clone positif

Optimisation de production dans E. coli

50 €

- Transformation des vecteurs dans 4 souches d’expression différentes

- Mini-tests d’expression (5ml) dans 2 milieux différents (LB et Auto-induction) et à 2 températures différentes (37 et 25°C)

- Extraction des fractions totales, solubles, et insolubles et analyse sur gel SDS-PAGE

- Détection des protéines recombinantes par Western-blot si nécessaire

Production en fermenteur 5 litres

40 €

- Milieu auto-inductible ZYP-5052

- Culture en batch à 25°C sur 24 heures

- Récolte des culots après 24 heures

- Analyse de la production sur gel SDS-PAGE

Obtention d’un baculovirus recombinant à partir d’un vecteur d’expression

120 €

- Système d’expression Bac-to-bac (Invitrogen)

- Milieu Ex-cell 420 (JRH)

- produit final : 50 ml de surnageant viral titré exprimant la protéine recombinante

Production en baculovirus : par litre de milieu Ex-cell 420 (JRH)

80 €

- densité des cellules à l’infection : 1,2 à 1,5 106 cellules/ ml

- Récolte des culots et ou surnageants entre 3 et 6 jours post-infection

- Analyse de la production sur gel SDS-PAGE

Titrage de baculovirus

5 €

Méthode des plages de lyses sur des dilutions virales de 10-2 à 10-7

Purification de protéines :

prix catalogue

- Achat de colonne

- Purification (par étape et par passage machine) :

- Extraction (tampon de lyse et broyage)

- Purification par échange d’ion

- Purification par affinité

- Purification d’anticorps

- Purification par gel filtration / déssalage

- Les différents tampons sont préparés par la plate-forme

- Les produits de purification sont analysés sur gel SDS-PAGE et par Western-blot si nécessaire

40 €